Διακεκριμένος Ρωμαίος πολίτης και γεννήθηκε το 340 μ.Χ. Σπούδασε ρητορική, φιλοσοφία και νομικά. Στα Μεδιόλανα ασχολήθηκε με το επάγγελμα του δικαστή. Φύλασσε με λόγια και έργα την αλήθεια και απέδιδε αντικειμενικά τη δικαιοσύνη. Ασπάσθηκε τον Χριστιανισμό, έγινε έπειτα αναγνώστης, πέρασε όλους τους εκκλησιαστικούς βαθμούς και στο τέλος χειροτονήθηκε επίσκοπος Μεδιολάνων (σημερινό Μιλάνο).

Σαν επίσκοπος, ο Αμβρόσιος ποίμανε άριστα το ποίμνιό του, αγωνίστηκε κατά των αιρέσεων, αλλά και στο βασιλιά Θεοδόσιο (γνωστό σήμερα σαν Μέγα άγιο Θεοδόσιο) δεν επέτρεψε να εισέλθει στο ναό, ζητώντας του να μετανοήσει ειλικρινά για τους φόνους, πέραν των 15.000 Ελλήνων, που έκανε στον Ιππόδρομο της Θεσσαλονίκης.

Διετέλεσε πνευματικός πατέρας του Αγίου Αυγουστίνου. Πέθανε ειρηνικά το έτος 397 μ.Χ., σε ηλικία 57 χρονών.

Τὸν τῆς ἀμβροσίας ἐπώνυμον, καὶ τῆς Ἰταλίας διδάσκαλον, τὸν προστάτην τῆς Χριστοῦ Ἐκκλησίας, καὶ Μεδιολάνων τὸν πρόεδρον, τὸν τοῦ ἐπάρχου υἱόν, καὶ τῶν πτωχῶν ἀντιλήπτορα μέγιστον, Ἀμβρόσιον τὸν ἔνδοξον Ἱεράρχην πάντες τιμήσωμεν, πρεσβεύει γὰρ Κυρίῳ ἐλεηθῆναι τὰς ψυχὰς ἡμῶν.